一、DNA重组技术原理？

原理是将两种DNA分子通过限制性内切酶和连接酶拼接到一起发挥影响。重组DNA技术是指将一种生物体（供体）的基因与载体在体外进行拼接重组，接着转入另一种生物体（受体）内，使之按照大众的愿望稳定遗传并表达出新产物或新性状的DNA体外操作程序，也称为分子克隆技术。因此，供体、受体、载体是重组DNA技术的三大基本元件。

二、DNA重组的流程？

基本步骤

1 目的基因的获得

技巧有：基因文库（cDNA文库、基因组文库）、PCR（放达效应）、人工合成

2 目的基因与载体连接

技巧有：

——粘性末端——全同源性、定向克隆（两种酶切）

定向克隆可防止高背景的产生，由于全同源性会造成载体自连、重组子、目的基因自连三种可能，重组子可能还会出现正反插入的情况，使筛选经过复杂。

——平末端

酶切后也有可能产生平末端，也会出现高背景。

——人工接头——连接子（连入带粘性酶切位点的片断，再酶切）、普适子（一条链连上片断，成为粘性末端）、T-A克隆（PCR中使用的Taq聚合酶会根据模板延伸至后在链末尾加上一个A，可在克隆载体上加上T，使之连接）、同聚物加尾（末端转移酶加尾）

由于平末端连接效率比较低，可在其两端人工修饰

反应体系：目的基因、载体、T4连接酶、缓冲液

3 重组DNA导入受体（宿主）细胞——转化、转染、转导、感染

主要运用的是原核转化（导入感受态细菌，感受态：处于易于吸收外缘DNA的情形，技巧：氯化钙法：DNA与其形成羟基-磷酸钙复合物，抗DNase水解）、真核转染。

4 筛选与鉴定

技巧：

——遗传学（表形）——插入失活、蓝-白筛选、抗性基因（四环素Tet、氨苄青霉素Amp）

——酶切，在电泳（分子量、构想）

——PCR（特异性引物）

——核酸杂交（southern blot）

——免疫学技巧（western blot）

——DNA测序（sanger、焦磷酸测序）

三、DNA重组技术的特点是何？DNA重组技术？

　　基因工程（genetic engineering）又称基因拼接技术和DNA重组技术，是以分子遗传学为学说基础，以分子生物学和微生物学的现代技巧为手段，将不同来源的基因按预先设计的蓝图，在体外构建杂种DNA分子，接着导入活细胞，以改变生物原有的遗传特性、获得新品种、生产新产品。基因工程技术为基因的结构和功能的研究提供了有力的手段。　　重组DNA技术一般包括四步：　　

①产生DNA片段；　　

②DNA片段与载体DNA分子相连接；　　

③将重组DNA分子导入宿主细胞；　　

④选出含有所需要的重组体DNA分子的宿主细胞。　　在具体职业中选择哪条技术路线。主要取决于基因的来源、基因本身的性质和该项遗传工程的目的。

四、DNA重组包括哪些步骤？

①外源基因的获得.如酶切法、反转录法人工合成法

②载体的获得.质粒、噬菌体

③获得重组体.

④重组体导入受体细胞核.转化、转导、杂交、细胞融合、显微注射技术

⑤对吸收重组dna 的细胞进行筛选鉴定.

⑥对含有重组dna 细胞进行大量培养,检测外源基因是否表达

五、dna重组技术应用实例？

医药行业

包括活性多肽、蛋白质和疫苗的生产，疾病发生机理、诊断和治疗新基因的分离以及环境监测与净化。胰岛素、人的生长激素、人的胸腺激素α-1、人的干扰素、牛的生长激素、乙型肝炎病毒抗原和口蹄疫病毒抗原等在基因重组技术中的应用大大促进了医学的提高。

发酵工业

用大肠杆菌生产人的生长激素释放抑制因子是第一个成功的实例。在9升细菌培养液中这种激素的产量等于从大约50万头羊的脑中提取得到的量。这是把人工合成的基因连接到小型多拷贝质粒pBR322上，并利用乳糖操纵子β-半乳糖苷酶基因的高效率启动子，构成新的杂种质粒而实现的。

利用遗传工程手段还可以提高微生物本身所产生的酶的产量。例如可以把大肠杆菌连接酶的产量提高500倍。

动植物育种和基因治疗

已经有一些研究职业明确地预示着重组DNA技术在这些方面的潜力。例如把来自兔的β-血红蛋白基因注射到小鼠受精卵的核内，再将这种受精卵放回到小鼠输卵管内使它发育，在生下来的小鼠的肝细胞中发现有兔的β-血红蛋白基因和兔的β-血红蛋白。

还有人把包括小鼠的金属巯基组氨酸三甲基内盐I（metallothioneineI）基因的启动子及大鼠生长激素结构基因的DNA片段注射进小鼠受精卵的前核中，由此发育得来的一部分小鼠由于带有可表达的大鼠生长激素基因，因此明显地比对照鼠长得大。这些实验结局为基因治疗展现了可喜的前景。

固氮的功能涉及17个基因，分属7个操纵子，现在已能把它们全部引入酵母菌，而且能正常地复制，不过还没有能使这些基因表达。改造玉米胚乳蛋白质而使人畜营养必需的赖氨酸和色氨酸成分增加的职业也在着手进行。大豆的基因已能通过Ti质粒引入向日葵。因此，可以预期随着时刻的推移在能源、农业、食品生产、工业化学和药品制造等方面都将会取得巨大的成果。

六、dna重组名词解释？

DNA重组（DNA recombination）实质上指的是遗传重组（genetic recombination），也称为遗传改组（genetic reshuffling），是指两个不同姐妹染色体间遗传物质的交换。

DNA重组导致后代产生不同于任一亲本的新性状。真核生物减数分裂期间的DNA重组产生新的遗传信息，并可以从父母传给后代。

大多数DNA重组是天然存在的。

七、dna重组技术的前景？

由于基因工程运用DNA分子重组技术,能够按照大众预先的设计创造出许多新的遗传结合体,具有新奇遗传性状的新型产物,增强了大众改造动植物的主观能动性、预见性。

而且在人类疾病的诊断、治疗等方面具有革命性的推动影响,对人口素质、环境保护等作出具大贡献。

因此,各国政府及一些大公司都特别重视基因工程技术的研究与开发应用,抢夺这一高科技制高点。其应用前景特别广阔。我国基因工程技术尚落后于发达民族,更应当加速提高,切不可坐失良机。然而,任何科学技术都是一把“双刃剑”,在给人类带来利益的同时,也会给人类带来一定的灾难。

比如基因药物,它不仅能根治遗传性疾病、恶性肿瘤、心脑血管疾病等。

八、DNA重组技术的基本工具？

包括限制性内切酶、连接酶和DNA聚合酶。限制性内切酶可以切割特定的DNA序列，使得DNA分子断裂成多段，为后续的DNA重组操作提供基础。连接酶能够将两端黏性末端的DNA片段连接在一起，从而实现DNA重组的目的。DNA聚合酶则是在合成新的DNA序列经过中起关键影响的酶类，能够将单链DNA模板转化为双链DNA，同时在合成新链的经过中根据模板上的碱基配对制度，实现DNA重组经过中的基础。DNA重组技术是一种重要的基因工程技术，通过对DNA分子的切割、连接和合成等操作，可以实现分子水平上的基因重组和修饰，为生活科学领域的研究和生物医药领域的开发提供了强有力的支持。

九、DNA重组技术名词解释？

基因重组指在生物体进行有性生殖的经过中，控制不同性状的基因重新组合。

其发生在二倍体生物的每一个世代中。每条染色体的两份拷贝在有些位置可能具有不同的等位基因，通过互换染色体间相应的部分，可产生于亲本不同的重组染色体。重组来源于染色体物质的物理交换，减数分裂前期，每条染色体有4份拷贝，所有的4份拷贝紧密相连，发生联会。这个结构称为二阶体，二阶体的每条染色体单元称为染色单体，染色体物质的两两交换就发生在不一样的染色单体（非姐妹染色单体）之间。

十、dna重组技术创始人？

1976年4月7日，科莱勒·帕金斯（Kleiner Perkins）公司（一家风险投资公司）的合伙人、27岁的罗伯特·斯万森与加州大学的生化学家、DNA重组领域的奠基人、美国基因工程技术公司，简称基因泰克，是由风险投资家Robert A. Swanson和生物化学家Herbert Boyer博士于1976创立的生物技术公司，被认为是生物技术行业的创始者。创始人Boyer博士，是DNA重组技术先驱者。